武汉天德生物芯片技术服务_分子病理

分子病理技术是病理学与分子生物学相互渗透形成的一门技术，旨在从分子水平研究疾病的发生、发展机制，为疾病的诊断、治疗和预后评估提供依据。以下是一些常见的分子病理技术：

一、核酸检测技术

• 聚合酶链反应（PCR）
  • 原理：以 DNA 为模板，在引物、DNA 聚合酶、dNTP 等作用下，经过高温变性、低温退火和适温延伸等步骤，使目的 DNA 片段在体外大量扩增，以便检测和分析。
  • 应用：用于检测病原体核酸，如乙肝病毒、人乳头瘤病毒等；也可用于检测肿瘤相关基因的突变、融合等，指导肿瘤的靶向治疗。
• 荧光定量 PCR（qPCR）
  • 原理：在 PCR 反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个 PCR 进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析。
  • 应用：常用于病原体载量监测，如艾滋病患者体内 HIV 病毒的定量；还可用于基因表达水平的定量分析，研究疾病发生过程中基因表达的变化。
• 二代测序（NGS）
  • 原理：可同时对数百万甚至数十亿条 DNA 分子进行平行测序，能快速、高效地获取大量基因序列信息。
  • 应用：全面检测肿瘤基因组中的基因突变、拷贝数变异、基因融合等，为肿瘤的精准分型和个体化治疗提供依据；还可用于遗传性疾病的基因诊断，发现致病基因的突变位点。

二、基因芯片技术

• 原理：将大量已知序列的 DNA 探针固定在微小的固相载体上，与标记的样品核酸进行杂交，通过检测杂交信号的强度和分布来分析样品中的基因表达谱、基因突变等信息。
• 应用：用于肿瘤的分子分型，根据基因表达谱将肿瘤分为不同的亚型，指导治疗方案的选择；还可进行药物基因组学研究，预测患者对药物的反应，实现个体化用药。

三、荧光原位杂交（FISH）技术

• 原理：用荧光标记的核酸探针与组织或细胞中的核酸进行杂交，通过荧光显微镜观察荧光信号的位置和数量，来检测基因的存在、缺失、扩增或易位等情况。
• 应用：在乳腺癌中，检测 HER2 基因的扩增情况，指导靶向药物赫赛汀的使用；在淋巴瘤诊断中，用于检测染色体易位等异常，辅助疾病诊断和分型。

四、蛋白质检测技术

• 免疫组化（IHC）
  • 原理：利用抗原与抗体的特异性结合，通过标记抗体来检测组织或细胞中的蛋白质表达情况，常用的标记物有酶、荧光素、放射性核素等。
  • 应用：用于肿瘤标志物的检测，如检测肺癌中的 TTF-1、P63 等标志物，辅助肿瘤的诊断和鉴别诊断；还可用于研究蛋白质在组织中的定位和分布，了解其功能和作用机制。
• 蛋白质印迹法（Western blot）
  • 原理：将蛋白质样品经聚丙烯酰胺凝胶电泳分离后，转移到固相膜上，再用特异性抗体进行检测，通过化学发光或显色反应显示目的蛋白质的条带，从而分析蛋白质的表达水平、分子量大小等信息。
  • 应用：常用于检测细胞或组织中特定蛋白质的表达量变化，研究疾病发生过程中蛋白质表达的调控机制；也可用于验证基因表达的翻译产物，评估基因治疗的效果。

五、甲基化检测技术

• 甲基化特异性 PCR（MSP）
  • 原理：先将基因组 DNA 进行亚硫酸氢盐处理，使未甲基化的胞嘧啶转化为尿嘧啶，而甲基化的胞嘧啶保持不变，然后设计针对甲基化和非甲基化序列的特异性引物进行 PCR 扩增，通过电泳检测产物来判断基因的甲基化状态。
  • 应用：用于肿瘤相关基因的甲基化检测，如 RASSF1A 基因的甲基化与肺癌、乳腺癌等多种肿瘤的发生发展相关，可作为肿瘤早期诊断的标志物。
• 焦磷酸测序技术
  • 原理：在 DNA 聚合酶等酶的作用下，引物上每添加一个 dNTP 就会释放一个焦磷酸，通过检测焦磷酸的释放量来确定 DNA 序列中碱基的组成和甲基化程度。
  • 应用：可对特定基因区域的甲基化水平进行定量分析，研究基因甲基化与疾病的关系，如在神经系统疾病中，检测相关基因的甲基化变化，探索疾病的发病机制。