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偶联和标记服务
服务简介

抗体标记服务是一项先进的生物技术服务,旨在为科研、医疗和诊断等领域提供关键的工具和支持。

抗体标记是通过特定的化学或生物方法,将具有可检测性的分子(如荧光染料、放射性同位素、酶等)连接到抗体分子上,从而使抗体具有特定的检测或功能

服务内容
  1. 客户需求评估
    与客户充分沟通,了解其研究目的、实验设计以及对抗体标记的具体要求。
    例如,是用于流式细胞术检测、免疫荧光成像还是其他特定的应用。

  2. 抗体选择与准备
    根据客户需求,协助选择合适的抗体,确保抗体的特异性、亲和力和纯度符合要求。
    对抗体进行预处理,如纯化、浓缩或稀释,以达到最佳的标记条件。

  3. 标记物选择与优化
    提供多种标记物选项,如荧光染料、酶、放射性同位素等,并根据实验需求和检测方法选择最适合的标记物。
    对标记物的浓度、反应条件等进行优化,以确保高效且稳定的标记效果。

  4. 标记反应与监控
    严格按照标准化的操作流程进行抗体标记反应。
    实时监控反应进程,通过检测标记效率、抗体活性等指标,保证标记的质量和效果。

  5. 分离与纯化
    采用合适的方法,如色谱层析、超滤等,去除未反应的标记物和杂质,获得纯净的标记抗体。

  6. 质量检测与验证
    对标记后的抗体进行全面的质量检测,包括抗体活性、标记效率、特异性结合能力等。
    采用标准品和对照实验进行验证,确保标记抗体符合预期的性能标准。

  7. 数据报告与结果分析
    为客户提供详细的实验报告,包括标记过程、质量检测数据和结果分析。
    对可能出现的问题提供专业的解释和建议。

  8. 售后服务与技术支持
    解答客户在使用标记抗体过程中遇到的问题,提供技术指导和解决方案。
    根据客户反馈,对服务进行持续改进和优化。

 

服务特色

我们的抗体标记服务具有以下显著特点和优势:

  1. 高度的特异性:确保标记后的抗体能够精准识别和结合目标抗原,提供准确可靠的检测结果。
    例如,在肿瘤标志物的检测中,特异性标记的抗体能够准确区分肿瘤细胞和正常细胞表达的特定蛋白。

     
  2. 多种标记选择:提供丰富的标记物选项,包括但不限于常见的荧光染料(如 FITC、PE、Cy3 等)、酶(如 HRP、AP 等)以及生物素等。
    以荧光染料标记为例,不同的荧光颜色可用于同时检测多个目标分子,提高检测的效率和信息量。

     
  3. 严格的质量控制:采用先进的检测技术和严格的质量标准,对标记后的抗体进行全面的质量评估,包括标记效率、活性、稳定性等。
    每一批次的抗体标记产品都经过严格的性能验证,确保在实际应用中的可靠性。

     
  4. 定制化服务:根据客户的特定需求,提供个性化的抗体标记方案,满足不同实验和应用场景的要求。
    比如,为特定的免疫组化实验定制具有特定标记和浓度的抗体。
QA/QC

戊二醛交联法

戊二醛是一种常用的同型双功能交联剂,通过它的两个醛基分别与HRP和抗体蛋白的氨基结合,形成HRP-戊二醛-Ab蛋白结合物。反应可在4-40温度范围,pH6.08.0 的缓冲溶液中进行,分为一步法和二步法,戊二醛一步法是将酶和待标记抗体混合,同时加入戊二醛进行交联反应。戊二醛二步法是将酶先与戊二醛作用,形成酶-戊二醛结合物,结过透析或层析除去未结合的戊二醛,然后再与抗体结合。

 

 

[标记步骤]

  1. 10mgHRP溶于0.2 mL1.25%戊二醛(0.01mol/LpH6.8PB25%戊二醛稀释为1.25%),室温(20左右)反应结合18h。
  2. 0.15mol/LNaCl平衡过的Sephadex G-50凝胶柱洗脱,除去游离的戊二醛,或用0.01mol/LpH7.2PBS4℃透析过夜。
  3. 5mg抗体IgG溶于1mL0.15mol/L NaCl,再与醛化HRP溶液(10mg/mL)混合。
  4. 加入0.1mL 1mol/L pH9.6碳酸盐缓冲液(调节pH9.09.6),4,电磁搅拌下结合24h
  5. 加入0.1mL0.2mol/L赖氨酸(0.29g溶于10mL蒸馏水),4放置2h,以封闭残留的醛基,终止反应。
  6. 装入透析袋,以0.01mol/LpH7.2 PBS4透析过夜,或通过Sephadex G-200凝胶柱层析,用PBS洗脱,收集第1峰洗脱液,加入等量60%甘油,测工作效价后,小量分装,4-20保存。