武汉天德生物的 IP/Co-IP 检测服务 是基于抗原-抗体特异性结合原理，专为解析复杂生物体系中蛋白质相互作用网络而打造的高端技术平台。

免疫沉淀（IP） 技术如同精准的“分子钓钩”，利用特异性抗体从复杂的细胞裂解液中高效富集并纯化目标蛋白；而 免疫共沉淀（Co-IP） 则在此基础上更进一步，它不仅捕获目标蛋白（诱饵蛋白），还能将与其在体内天然结合的“伙伴”蛋白（猎物蛋白）一同沉淀下来。这项服务是验证蛋白质直接或间接相互作用、解析多蛋白复合物组成以及筛选未知互作蛋白的“金标准”，广泛应用于疾病机制解析、信号通路研究及创新药物靶点发现等领域。

 

• 1.样本制备与预处理

1. 多样化样本支持：支持动植物组织、器官、细胞沉淀等多种样本类型。

2. 蛋白表达构建：若客户无现成样本，我们可根据提供的基因序列，协助进行诱饵蛋白或目的蛋白的质粒构建与表达。

3. 温和裂解体系：采用优化的非变性裂解缓冲液，在有效释放胞内蛋白的同时，最大程度保留蛋白质天然的构象与相互作用复合物，并添加蛋白酶/磷酸酶抑制剂防止降解。

• 2.抗体筛选与验证

1. 灵活抗体策略：客户可自备抗体，亦可由天德生物提供经严格验证的高特异性抗体库。

2. 亲和力评估：所有用于 IP/Co-IP 的抗体均经过特异性与亲和力测试，确保能高效捕获目标蛋白，从源头降低非特异性背景干扰。

• 3.免疫沉淀反应

1. 高效捕获：将预处理样本与特异性抗体孵育，随后加入 Protein A/G 磁珠（或琼脂糖珠）。

2. 复合物形成：构建“磁珠-抗体-诱饵蛋白-互作蛋白”的稳固复合物。对于内源性 Co-IP，我们将严格控制孵育条件，促进微量免疫复合物的有效形成。

• 4.严谨洗涤与温和洗脱

1. 高严谨度洗涤：通过多次梯度洗涤，彻底去除非特异性吸附的杂蛋白，显著降低背景噪音。

2. 温和洗脱：采用温和的洗脱条件（如低 pH 或竞争性多肽），将完整的蛋白复合物从磁珠上释放，确保互作蛋白不脱落，维持复合物的完整性。

• 5.多维检测与分析

1. Western Blot 验证：针对已知互作蛋白，利用 WB 技术进行定性及半定量分析，直观展示互作条带。

2. 质谱（MS）鉴定：针对未知互作蛋白筛选，联用高灵敏度液相色谱-串联质谱技术，全面鉴定复合物成分，提供分子量、氨基酸序列及修饰位点等深层信息。

• 6.结果交付与解读

1. ​​​​​​​全景实验报告：交付包含实验设计、样本信息、抗体参数、原始胶图/WB 条带、质谱鉴定列表的完整报告。

2. 专家级解读：技术团队结合生物学背景，深度剖析蛋白质相互作用的可能性及其生理病理意义，为您的科研假设提供数据支撑。

• 01· 高特异性与超高灵敏度：依托严格筛选的高亲和力抗体与优化的磁珠偶联技术，我们能够有效富集低丰度蛋白，即使在复杂的背景中也能精准捕捉微弱的相互作用信号，显著降低假阴性率。
• 02· 高度还原生理状态：实验全程在接近体内生理环境（非变性条件）下进行，确保检测到的蛋白互作是天然、真实的生理过程，而非体外人为假象，真实反映细胞内的分子机制。
• 03· 资深专家团队护航：我们的技术团队拥有深厚的分子生物学背景与丰富的 IP/Co-IP 实战经验，能够针对难溶蛋白、弱相互作用等棘手问题提供定制化解决方案。
• 04· 深度个性化定制：拒绝千篇一律。我们根据客户的研究目的（验证性 vs 探索性）及样本特性，量身定制从裂解液配方、抗体选择到检测手段的全套方案。
• 05· 严苛的全流程质控：建立标准化的 SOP 体系，严格设置 Input（阳性对照）、IgG（阴性对照）及 Output 等关键质控节点，定期校准仪器设备，确保每一份数据的可靠性与可重复性。
• 06· 一站式省心服务：提供从实验设计、样本处理、免疫沉淀、下游检测到数据分析的全链条服务。客户无需多方协调，即可坐享高质量、连贯性的实验结果。

质量控制是实验成功的生命线。在 IP/Co-IP 服务中，我们实施了多维度的质控措施：

1. Input 对照：直接检测细胞裂解液，验证诱饵蛋白与猎物蛋白在样本中的存在。
2. IgG 阴性对照：使用同种属非特异性 IgG 替代特异性抗体，排除蛋白与抗体或磁珠的非特异性吸附。
3. 预清除处理：在正式 IP 前进行预清除，进一步降低背景噪音。
4. 重复性验证：关键实验步骤进行技术重复，确保结果的统计学意义。