人淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒IgG抗体检测试剂盒（LCMV ELISA KIT)
1 、 试剂盒简介
此LCMV试剂盒，采用间接法酶联免疫吸附试验。依次往预包被LCMV抗原的酶标板微孔中加入样本、HRP标记二抗，经过孵育并彻底洗涤。用底物TMB显色后终止液终止反应。再用酶标仪在波长450nm（参比波长630nm）处测定吸光度（OD值），从而判定检测样品中抗LCMV抗体（LCMV-IgG-Ab）的存在与否。
2 、 试剂盒组分：
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序号
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名称
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配置
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1
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LCMV预包被酶标板（96T）
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1块
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2
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稀释缓冲液
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1瓶（30 mL）
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3
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浓缩洗涤液（10X）
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1瓶（30 mL）
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4
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酶标山羊抗人二抗
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1瓶（20μL）
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5
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TMB显色液
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1瓶（13 mL）
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6
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终止液（2M ，H2 SO4）
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1瓶（8 mL）
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7
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使用说明书
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1份
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3 、 样品收集、处理及保存方法
3.1 血清：用不含热源和内毒素的试管，收集血液后，等待血液凝固。3000rmp离心10min将血清和血细胞迅速小心地分离。
3.2 血浆：EDTA 、柠檬酸盐或肝素抗凝，3000rmp离心10min取上清。
3.3 细胞上清液：3000rmp离心10min去除颗粒和聚合物。
3.4 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎，3000rmp离心10min取上清。
3.5 保存：如果样品收集后不及时检测，请按一次使用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融；使用前在室温下解冻并确保样品均匀地充分混匀。
4 、实验器材：
酶标仪（波长450 nm），10 μL 、100 μL 、1 mL移液器，300 μL多道移液器，移液器吸头、37℃恒温水浴箱。
5 、操作步骤：
5.1 将浓缩洗涤液（10X）用蒸馏水做10倍稀释，配制成工作洗涤液。
5.2 取出包被有LCMV抗原的96孔酶标板在室温平恒回温，在加样品前拆开密封的铝箔袋。
5.3 将待检样本用稀释缓冲液做1: 200稀释，100 μL/孔，加入各反应孔。（加样过程须在15 min内完成）
5.4 置37℃恒温培养箱避光反应1 h ，孵育完成后弃液，并用工作洗涤液250 μL/孔洗涤90s ，洗涤三遍，在无纤维纸上拍干。
5.5 根据待测样品数量取相应体积的酶标山羊抗人二抗并用稀释缓冲液1:1000倍稀释（现用现配），100 μL/孔，置37℃恒温培养箱避光反应1 h 。工作洗涤液250 μL/孔洗涤90s，洗涤四遍，在无纤维纸上拍干。
5.6 用移液器加TMB底物显色液100 μL/孔（提前恢复至室温），37℃避光反应5min ，请勿震荡。
5.7 移液器加终止液50 μL/孔，稍微震荡5s混匀。
5.8 15min内用酶标仪450 nm波长处读数。
6 、注意事项：
6.1 试剂盒各组分使用前应室温平衡至少20min 。浓缩洗涤液复温前瓶底会有结晶物，切记完全溶解后再做稀释用。
6.2 样品如为冻干制剂，应用样品稀释液充分溶解混匀后再用。
6.3 反应时应将酶标板放入洁净的密闭空间中，防止反应孔中落入异物。
6.4 洗涤拍干后，应消除各孔内残余的气泡。
6.5 开封后，将未使用的板条放回加入干燥剂的密封铝箔袋中，置4℃密闭保存。
6.6 在操作过程中，使用全新洁净的移液器吸头、洗涤机（瓶）、器皿等。
6.7 本试剂盒仅供科研使用，不得用于临床实验和人体实验，否则所产生的一切 后果，由实验者承担 ，本公司概不负责。
7 、结果判定：
7.1 实验结果须满足以下有效参数为成立：
阳性孔参考值：OD450 >0. 100；阴性孔参考值：OD450 ≤0.100
抗体
试剂盒
多肽
探针
蛋白
组织芯片
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